1. 明场
测量前,充分混匀细胞悬液(用1mL移液器反复吸打混匀10次),取出20μL匀速注入到对应的通道内。稍待片刻,点击“计数”,设备自动进入聚焦曝光,数秒后显示实时图像,旋即弹出计数结果界面。
稀释方法:通过输入目标浓度和目标体积,自动计算稀释方法。
优化设置:对细胞进行直径大小,阈值[1]的设门,在新参数下再次计算。
直方图:细胞直径分布图,结团分布图。
显示结果图、查看原图:原图和结果图查看切换。
2.台盼兰
测量前,充分混匀细胞悬液(用1mL移液器反复吸打混匀10次),取出10μL细胞悬液和台盼兰染液(10μL)1:1混匀,取出20μL匀速注入到对应的通道内。在该界面右上角选择“算法曝光”,点击“计数”,设备自动进入算法曝光和自动聚焦,数秒后显示实时图像,旋即弹出计数结果界面。“定值曝光”延续了上一次算法曝光的曝光值,直至再次进行“算法曝光”。当更换台盼兰染料时,首次测量请调整至“算法曝光”进行。
3.AOPI
测量前,充分混匀细胞悬液(用1mL移液器反复吸打混匀10次),取出10μL细胞悬液和AOPI染液(10μL)1:1混匀,取出20μL匀速注入到对应的通道内。点击AOPI,根据下面的规则选择子app:
① 规则细胞和不规则细胞app:测正常大小的哺乳动物细胞;
② pbmc app:测传代的小细胞(背景干净,非原代或组织裂解,或是血液提取的小细胞。如pbmc, T细胞均是分离纯化的细胞类型,无杂质,无碎片)。
③ 血液app:单细胞测序多用这个app,适合原代,组织裂解,血液提取的细胞,如原代分离的pbmc,有杂质,富含碎片的样本。
针对样本对aopi不同的着色效果,右上角设置了三档曝光时间支持切换,在样本着色较浅的时候可以选择“高”曝光来补偿。
[1] Halo Counter 采用的神经网络AI算法,“阈值”设定的越小,原则上识别的细胞越多。
[2] Halo Counter 计数板具备调节高度功能,请在测样品前确认高度是否被人为修改。